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RiboCraft Alpha

RNA Transfection Reagent

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库存 : 2000

单位 : 200 µL/管

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RiboCraft Alpha是一种基于多电荷纳米载体的创新转染试剂,专为高效稳定地将 RNA 递送至目标细胞而设计开发。该产品溶解性好,结构稳定,适用于多种细胞系。其卓越的稳定性和多功能性确保在不同实验条件下保持高效一致的转染效果,广泛支持从基础科研到临床前研究的应用。

 

  • 广泛兼容性:适用于多种细胞类型
  • 高效多功能转染:能够高效递送多种RNA,包括mRNA,siRNA,和基因编辑
  • 简易的使用方法:使用时仅需简单的混合,操作简便,封装率高
  • 灵活剂量选择:支持在不同剂量范围内递送RNA,满足多种应用场景
  • 实验重复性好:在不同的孵育时间和温度下,保持一致且可重复的转染效果
  • 缓冲液兼容性:配制样品可兼容多种缓冲液、pH环境,满足不同实验需求
  • 血清耐受性:对培养基中的血清具有一定的耐受性,确保复杂环境中的高效转染
  • 储存条件:在 2-8 °C保存,长期可冷冻保存在 -20 °C
  • 有效期:1年

所需材料:RiboCraft Alpha 转染试剂RNA 储备溶液无RNA酶水无血清培养基或Opti-MEM™ 降血清培养基

  1. mRNA转染实验

1.1  建议剂量和配置方法

在96孔板中进行 mRNA 转染实验时,建议的试剂用量如下:

            V (H2O) = V(制剂体积) – V(mRNA储备液) – V (RiboCraft Alpha)

            为确保移液准确,请准备足够体积的主混合液,至少能满足6个孔的需求。

            以准备8复孔的用量为例,移液枪法混合样品:2.40 µL mRNA储备液(0.1 mg/mL)与 20.8 µL 无 RNase 水混合,用移液枪混合10次。然后加入 0.8 µL RiboCraft Alpha,用移液枪混合30次。让溶液在室温下静置 3 分钟。

            可根据表格中推荐的范围优化配方中mRNA 剂量(ng/well)与RiboCraft Alpha 剂量(µL/well)。二者的比例无需固定在300: 1(mRNA 剂量: RiboCraft Alpha 剂量)。使用高剂量mRNA 时,可搭配低剂量的RiboCraft Alpha以节约试剂用量。

            mRNA 储备溶液建议浓度:0.1 1 mg/mL建议使用化学修饰的 mRNA(如5-甲基胞苷、假尿苷)

            不同培养体积的用量表推荐

该表使用量仅供参考,mRNA 与转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化

1.2  操作步骤

            在转染实验前一天种细胞。在转染实验当天,将细胞生长培养基更换为预热的无血清培养基或降血清培养基。悬浮细胞可以在转染前种于无血清培养基中。(转染操作时,以细胞融合度达70% 80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定)

            96孔板规模实验,以准备8复孔的用量为例,振荡器法混合样品:

           向一个1.5 mL的微离心管中加入20.8 μL 无RNase水。

           在室温下向水中添加0.8 μL的RiboCraft Alpha,通过移液枪或涡旋振荡充分混合。

           加入 2.4 µL mRNA 储备溶液(0.1 mg/mL),用移液枪混合5次。

           将样品置于摇床上(900 rpm,25°C)摇动30秒, 必要时使用快速离心。

           在室温下静置3分钟(纳米复合体通过快速自组装形成,并且在室温下可稳定30分钟)。

           将转染复合物添加至细胞培养板每个孔中的无血清或降血清培养基摇板混匀。最终每孔mRNA剂量为 30 ng,总体积为100 μL。


  1. siRNA 转染实验
    1.  建议剂量和配置方法

在48孔板中进行siRNA 转染实验时,建议的试剂用量如下:

参数

siRNA

RiboCraft Alpha

配方中siRNA

最终浓度

制剂体积

混合后静置时间

(pmol/well)

(µL/well)

(µM)

(µL/well)

(min)

推荐用量

5

0.75

1

5

3

优化范围

5 – 25

0.15 – 3.75

1 – 2

2.5 – 25

0 – 20

            V (H2O) = V(制剂体积) – V(siRNA储备液) – V (RiboCraft Alpha)

            为确保移液准确,请准备足够体积的主混合液,至少能满足6个孔的需求。

            以准备6复孔的用量为例,移液枪法混合样品:3.0 µL siRNA储备液10 µM)与 22.5 µL 无 RNase 水混合,用移液枪混合10次。然后加入 4.5 µL RiboCraft Alpha,用移液枪混合30次。让溶液在室温下静置 3 分钟。

            可根据表格中推荐的范围优化配方中siRNA 剂量(pmol/well)与RiboCraft Alpha 剂量(µL/well)。二者的比例无需固定在20: 3(siRNA 剂量: RiboCraft Alpha 剂量)。使用高剂量siRNA 时,可搭配低剂量的RiboCraft Alpha以节约试剂用量

            siRNA 储备溶液建议浓度:10 – 100 µM

            不同培养体积的用量表推荐

 

multiple factor

Culture Area (cm2)

Cells/well (adherent cells)

Cells/well (suspension cells)

Medium Volume

(µL per well)

siRNA (pmol per well)

RiboCraft Alpha

(µL per well)

Formulation Volume

(µL per well)

96-well

0.2

0.32

1.0 x 104

5 x 104

100

2.00

0.30

2.0

48-well

0.5

0.95

2.5 x 104

1.25 x 105

250

5.00

0.75

5.0

24-well

1

1.9

5.0 x 104

2.5 x 105

500

10.00

1.50

10.0

12-well

2

3.8

1.0 x 105

5.0 x 105

1000

20.00

3.00

20.0

6-well

5

9.5

2.5 x 105

1.25 x 106

2000

50.00

7.50

50.0

T25

7

25

7.0 x 105

3.5 x 106

5000

70.00

10.50

70.0

该表使用量仅供参考,siRNA 与转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化

2.2   操作步骤

            在转染实验前一天种细胞。在转染实验当天,将细胞生长培养基更换为预热的无血清培养基或降血清培养基。悬浮细胞可以在转染前种于无血清培养基中。(转染操作时,以细胞融合度达70% 80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定)

            48孔板规模实验,以准备6复孔的用量为例,振荡器法混合样品:

           向一个1.5 mL的微离心管中加入22.5 μL无RNase水。

           在室温下向水中添加4.5 μL的RiboCraft Alpha,移液混合5次

           加入3.0 μL的siRNA储备溶液(10 µM),用移液枪混合5次

           将样品置于摇床上(900 rpm,25°C)摇动30秒

           在室温下静置3分钟(纳米复合体通过快速自组装形成,并且在室温下可稳定30分钟)。

           5 μL转染复合物添加至细胞培养板每个孔中的无血清或降血清培养基摇板混匀最终每孔siRNA剂量为 0.02 µM ,总体积为250 μL。

            在 37°C、5% CO 的环境中孵育4 6小时。若需更长时间培养,可更换培养基或者补充完全培养基

如需更多信息或技术支持,请联系:

            电子邮件:contact@N1LabSolutions.com

            官方网站:https://www. N1LabSolutions.com

 

免责声明:本产品仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗。使用者应严格遵守实验室安全规范,按照使用说明正确使用本产品。

  • 头像

    张博士,上海某生物公司

    RiboCraft Alpha是我们实验室转染实验中的一款明星产品。它的高效转染性能和简便的操作让我们的工作轻松了许多,效果显著。

    2024-10-16

  • 头像

    李同学,北京大学

    我们用RiboCraft Alpha进行了的mRNA递送实验,结果非常稳定。有一次配好后室温放置二十多分钟才加入细胞, 试剂依旧保持高效,非常推荐!

    2024-10-15

  • 头像

    Dr. Cooper, Senior Scientist, Boston Pharmaceuticals

    The serum tolerance of RiboCraft Alpha really sets it apart. Even in challenging environments, it delivers excellent transfection efficiency.

    2024-10-15

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    王研究员,广州医药研究院

    这款转染试剂的包封率特别高,操作步骤简单,一步混合即可,非常适合我们团队的日常实验需求。

    2024-10-13

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    刘研究员,武汉大学

    我们实验室主要做mRNA递送实验,RiboCraft Alpha 的兼容性非常好,能适应不同的缓冲液和培养基,结果令人满意。

    2024-10-12

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    周教授,南京生物科技中心

    RiboCraft Alpha的灵活剂量范围是一个大亮点,不论我们使用低剂量还是高剂量,它的转染效率一直很出色。

    2024-10-12

  • 头像

    Mr. Smith, University of California, San Diego

    I am using RiboCraft Alpha for multiple cell lines, and the results are consistent every time. Its stability under different conditions is outstanding.

    2024-10-10